MGC80-3 (人胃癌細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系)

商品屬性

商品介紹

別稱(chēng) MGC803; MGc80-3

年齡（性別） 男

組織來(lái)源 胃癌

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述：MGC80-3細(xì)胞是從一位53歲男性原發(fā)性胃低分化粘液樣腺癌患者建立的；MGC80-3細(xì)胞可在免疫抑制的Wistar雄幼大鼠皮下移植成功。(STR檢測(cè)位點(diǎn)同HELA)

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~22-36 hours

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白11(IP-11/CXCL11)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： IP-11/CXCL11 ELISA Kit

Porcine ierleukin 3 (IL-3) ELISA Kit 豬白介素3(IL-3)檢測(cè)試劑盒

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體液葡萄糖氧化酶比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

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KIAA1279重組人 KIAA1279 蛋白 Protein

CCNE1 Protein Human 重組人 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白

NA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶1(NOX1)重組蛋白 Recombinant Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1 (NOX1)

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ERBB2重組人 HER2 / ErbB2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

NA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

KIAA1279重組人 KIAA1279 蛋白 Protein

MGC80-3 (人胃癌細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系)小鼠乙酰(ACH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble factor related apoptosis ligand (sFASL) ELISA Kit 人可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)檢測(cè)試劑盒

HumanGlomerulaissueexact-advancedglycosylationendproducts,GTE-AGEELISAKit 人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor5-HT(Human5-Hydroxyyptamine)ELISAKit人5羥色胺

飲料氨熒光定量檢測(cè)試劑盒20次

MouseMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAKit小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

性激素結(jié)合球蛋白   英文名稱(chēng)：   Sex Hormone Binding Globulin   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   SHBG

血小板衍生生長(zhǎng)因子   英文名稱(chēng)：   Platelet Derived Growth Factor   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   PDGF

胰島素原   英文名稱(chēng)：   Proinsulin   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   PINS

催乳素   英文名稱(chēng)：   Prolactin   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   PRL

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。