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豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格 詳細資料

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產(chǎn)品名稱:豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱:Porcine MHC Ⅲ ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進行。
豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

GPHA2    重組人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 蛋白 (Fc 標簽)    NsbI (FspI)
KCT2    重組人 KCT2 / C5orf5 蛋白 (His 標簽)    AdeI (DraIII)
GALNT2    重組人 GALNT2 / GalNAc-T2 蛋白 (His 標簽)    SmiI (SwaI)
COL5A2    重組人 COL5A2 蛋白 (Fc 標簽)    BcuI (SpeI)
PNLIPRP    重組人 PNLIPRP / PLRP 蛋白 (His 標簽)    BcuI (SpeI)
SMR3B    重組人 SMR3B 蛋白 (His 標簽)    BseMI (BsrDI)
CARTPT    重組人 CART / CARTPT 蛋白 (Fc 標簽)    BseMI (BsrDI)
CD33    重組人 CD33 / Siglec-3 蛋白 (His 標簽)    MbiI (BsrBI)
SLAMF6    重組人 SLAMF6 / Ly08 蛋白    PagI (BspHI)
NFASC    重組人 NFASC / Neurofascin 蛋白 (His 標簽)    PagI (BspHI)
ARF3    重組人 ARF3 / ADP-ribosylation factor 3 蛋白 (His 標簽)    TatI
EIF5A2    重組人 EIF5A2 蛋白 (His 標簽)    XagI (EcoNI)
CEBPG    重組人 CEBPG / CEBP gamma 蛋白 (His 標簽)    BplI
CHN    重組人 CHN / Chimerin 蛋白    BplI
CHN    重組人 CHN / Chimerin 蛋白 (His & GST 標簽)    BspPI (AlwI)
DPYS    重組人 DPYS / Dihydropyrimidinase 蛋白    BspPI (AlwI)凝固血液 DNAout    30 次    
Actinomycin D( 基因轉(zhuǎn)錄抑制劑 )    mg    
Lucigenin( 光澤精 )    0mg    
KOD DNA 聚合酶    250U    
22-0460-50    Mito-Tracker Green( 線粒體綠色熒光探針 )    50μL
30989-00    白細胞裂解液    00mL
    g    
丙烯酰胺    00g    
豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格一管式病毒 RNAout    50 次    
腸激酶 ( 輕鏈 )    0.063μg    
20906-200    人白細胞分離液 .078    200mL
70202-50    柱式酵母質(zhì)粒 DNAout    50 次
熱啟動 Tth DNA 聚合酶    250U    
磁珠血液 DNAout    50 次    
一管式 DNA 膠回收試劑盒    30 次    
小鼠內(nèi)皮細胞分離液 .07    200mL    

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