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ELISA試劑盒技術(shù)總結(jié)要點
.仔細閱讀說明書 確定試劑盒在有效期內(nèi)。
2.按說明書確定所有試劑齊全，以及所有實驗額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機等。
3.標本制備要規(guī)范，每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存)，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存。
4.按說明書將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑。
5.選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗，必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。
6.一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到5pg/ml。可利用標準的Elsia操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。